Anexo XIII - Instituto de Investigación Sanitaria San Carlos

1. Memoria descriptiva del procedimiento:
a) Denominación del procedimiento a realizar:
Implantación y evaluación de la acción estimuladora de un un
marcapasos y del efecto del fármaco Levosimendan, en un modelo
experimental porcino de insuficiencia cardiaca.
Procedimiento que se realizará para desarrollar el proyecto de
investigación titulado:
´´Evaluación de la posible acción proarritmia del Levosimendan en
un modelo porcino de insuficiencia cardiaca ´´.
b) Objetivos que se persiguen:
c) Metodología del procedimiento:
El procedimiento de implantación de un marcapasos para
desarrollar el mencionado proyecto de investigación, requerirá
realizar tres actuaciones en los cerdos:
1. Estudio ecocardiográfico y de presiones sanguíneas en cerdos
sanos y tras la implantación del marcapasos.
2. Activación y control del marcapasos.
3. Estudios ecocardiográfico, de presiones sanguíneas y
y
electrofisiológicos en cerdos con marcapasos.
1. Estudio ecocardiográfico y de presiones sanguíneas en cerdos
sanos y tras la implantación del marcapasos.
Se realizará un estudio ecocardiográfico utilizando un
ecocardiógrafo Accuson Ciprés Siemens®. Se realizará un estudio
de presiones sanguíneas y un estudio electrofisiológico utilizando
un polígrafo Prucka Cardiolab II Plus 64 General Electric®.
Con anestesia general, analgesia y respiración mecánica, se
realizará una punción de la arteria y la vena femorales. Estas vías
se utilizarán para la introducción de catéteres, para la realización
de estudios electrofisiológicos cardiacos.
Se realizará una punción de la arteria carótida para realizar un
estudio de presiones sanguíneas.
Se disecará la piel y el tejido subcutáneo de la región del cuello. Se
colocará el generador del marcapasos. A través de la vena yugular
hasta la vena cava, se insertará el cable de un marcapasos St Jude®
monocameral en el ventrículo derecho.
Se cerrará la piel utilizando una sutura sintética reabsorbible
multifilamentosa, poliglactina 910 de dos ceros. La línea de sutura se
infiltrará con un anestésico local.
2. Activación y control del marcapasos. Pasados siete días de la
intervención se procederá a activar el marcapasos. Se realizarán
controles periódicos para comprobar el funcionamiento de éste.
Dichos controles consistirán en realizar electrocardiogramas de
superficie y estudios ecocardiográficos. Esta prueba se realizará con
anestesia general y respiración espontánea o sin anestesia.
Dependiendo de los resultados de la exploración física del animal. Por
ser una prueba indolora y no invasiva podrá realizarse sin anestesia
ni analgesia. Esta prueba se realizará una vez a la semana.
3. Estudios ecocardiográfico, de presiones sanguíneas
y
electrofisiológico en cerdos con marcapasos. Pasados entre 15 y 30
días de la activación del marcapasos se realizarán estas pruebas con
anestesia general, analgesia y respiración mecánica. Se realizará una
punción de la arteria carótida para registrar las presiónes sistólica y
diastólica. Se realizará una punción de la arteria y la vena femorales
para la introducción de los catéteres. Se realizará un estudio
ecocardiográfico. Se realizará un estudio electrofisiológico cardiaco y
se inoculará por vía endovenosa el fármaco Levosimendan. Se
realizará una estereotomía media para explantar el corazón y se
realizarán estudios de mapeo óptico, utilizando el corazón en un
sistema in vitro de baño de órganos.
Anestesia, analgesia y tratamientos en cerdos:
1. Para los estudios ecocardiográfico, de presiones sanguíneas y
electrofisiológicos en cerdos sanos y después de la
implantación del marcapasos.
Para realizar esta parte del procedimiento utilizaremos anestesia
general, analgesia y respiración mecánica.
Se pesará cada animal en una báscula digital, Tru-Test Eziweigh
®
1 para animales.
Cada animal se premedicará con Ketamina. Ketolar®. La dosis
utilizada de ketamina será de 20 mg/kg, inyectada por vía
intramuscular, en la extremidad posterior del animal. Diez minutos
después se lavará el animal con agua y jabón y se le secará. Se
trasladará el animal al quirófano utilizando un carro de transporte
hidráulico. Se le subirá a la mesa de cateterismos.
Se administrará oxígeno al 100 % , se utilizará una máscara de
anestesia de 14 cm de diámetro, mientras el animal permanecerá en
respiración espontánea.
Se realizará una inducción anestésica con Propofol 1%. Se
inoculará una dosis de Propofol de 6 mg /kg, por vía intravenosa, a
través de un catéter intravenoso Vasocán® de 22 G 1” de calibre,
que se introducirá por la vena marginal de la oreja.
Se inoculará Besilato de atracurio, Tracrium® 50 mg. Glaxo
Smithkline S. A.
La dosis utilizada de Besilato de atracurio será de 0,2 mg/kg
por vía intravenosa.
Se inoculará como analgésico fentanilo , FENTANEST® KERN
PHARMA. La dosis de fentanilo empleada será de 0,005 mg/kg/h.
Se conectará al catéter intravenoso un equipo de infusión por
gravedad que se unirá a una llave de tres pasos.
Se inoculará, una solución de ClNa al 0,9%. La dosis de
perfusión será de 3 ml/kg/h.
Se utilizará un laringoscopio de pala plana, se levantará la
epiglotis del animal y se le introducirá un tubo orotraqueal de 6,0 oral
(6,0 mm ID 6,8 mm OD) y balón de 22 mm Hi-ContourTM. L. Se
hinchará el balón para fijar el tubo a la tráquea. La ventilación se
realizará utilizando un respirador volumétrico Datex Ohmeda Aestiva
5®.
Se suministrará un volumen tidal de 10 ml/kg, una frecuencia
respiratoria de 11 a 12 respiraciones por minuto, una presión máxima
inspiratoria de 20 mm de H2O y una PEEP de 4 mm de H2O. Se
suministrará una mezcla de oxígeno y aire medicinal de 100 ml/kg de
peso e Isoflurano, al 2%.
Se comprobará que el tubo endotraqueal está situado en la
tráquea, observando que aparezca en el monitor la curva de CO 2
espirado y auscultando con un fonendoscopio los dos hemitórax, para
oir la la ventilación de ambos pulmones.
Se monitorizará el animal, colocándole cuatro electrodos adhesivos
en la articulación húmero radiocubital de ambas extremidades
anteriores y en la articulación femorotibiorotuliana de ambas
extremidades posteriores. Se registrarán las derivaciones bipolares D
I, D II, D III y las derivaciones monopolares aumentadas avR, avL,
avF. La velocidad de registro será de 25 mm/seg y la amplitud será
de 1 cm/mV. También se monitorizará el animal con seis ó doce
derivaciones electrocardiográficas conectadas a un polígrafo. A este
equipo se conectará una línea para medir presiónes arteriales.
Se colocará un pulsioxímetro en la lengua del animal, dentro de la
cavidad bucal, para medir la saturación de oxígeno. Consideraremos
una saturación de oxígeno correcta un valor de 99 %. Se medirá el
CO2 espirado con una sonda de capnografía, unida al la salida del
tubo endotraqueal. Siendo el registro correcto entre 35-45 mm Hg.
Los gases anestésicos residuales se eliminarán mediante aspiración
por una torre de vacío.
Al finalizar la implantación del marcapasos y después de realizar
registros de presiones y el estudio electrofisiológico de control se
procederá a despertar el animal. Se mantendrá tapado el animal con
una manta térmica, se suprimirá el aporte de isoflurano y se
suministrará la mezcla de oxígeno y aire medicinal frescos hasta que
el animal respire espontáneamente y recupere la consciencia. En este
momento se extraerá el tubo endotraqueal.
Posteriormente se conducirá el animal al cercado existente en la
habitación de cerdos en experimentación del animalario. Para ello se
utilizará el carro hidráulico de transporte.
2. La anestesia local se realiza mediante una infiltración de la zona
quirúrgica del cuello con Mepivacaína al 2 %. B Braum® , un vial de
10 ml.
3. Tratamiento postoperatorio:
Se inoculará antibiótico durante 5 días: Amoxicilina y ácido
Clavulánico, Synulox®. La dosis será 11-22 mg/Kg por vía
intramuscular.
Se inoculará un antiinflamatorio no esteroideo: Meloxicam ® a
dosis de 0,2 mg/ kg por vía subcutánea durante 5 días.
Se inoculará analgésico: Buprenorfina, Buprex ®, a dosis 0,01
mg/kg por vía intramuscular.
2. Para la activación y el control del marcapasos se utilizará el
siguiente protocolo de anestesia general y respiración espontánea:
Se pesará cada animal en una báscula digital para animales.
Cada animal se premedicará con Ketamina, Midazolam ® y y
acepromacina.
La dosis de de ketamina que se utilizará será de 15 mg/kg.
La dosis de Midazolam que se utilizará será de 0,3 mg/kg.
Midazolam® 1mg/ml Combino Pharm y acepromacina maleato de
acepromacina, Calmo Neosan ® pfizer. 0,02 mg/kg. inyectados por
vía intramuscular, en la extremidad posterior del animal.
Posteriormente se lavará el animal y se transportará a quirófano
como se ha ha descrito anteriormente.
Se administrará oxígeno al 100 % , utilizando una máscara de
anestesia de 14 cm de diámetro. mientras el animal permanecerá en
respiración espontánea.
Se realizará una inducción anestésica con una mezcla de gases.
Se suministrará una mezcla de oxígeno y aire medicinal de 100 ml/kg
de peso e Isoflurano (Forane® ) al 2%.
Se monitoriza al animal, colocándole cuatro electrodos adhesivos
como se ha descrito anteriormente.
Es método de activación y control del marcapasos indoloro y no
invasivo.
Al finalizar la activación del marcapasos o los registros de control se
procederá a despertar al animal. Se suprimirá el aporte de isoflurano
y se suministrará la mezcla de oxígeno y aire medicinal fresco hasta
que el animal despierte. El control del funcionamiento del marcapasos
se podrá realizar sin anestesia ni analgesia, por ser un procedimiento
no invasivo e indoloro.
3. Estudios ecocardiográfico, de presiones y electrofisiológico en
cerdos con marcapasos.
Para esta parte del procedimiento utilizaremos anestesia general
y respiración mecánica.
Se pesará cada animal en una báscula digital marca Tru-Test
Eziweigh 1® para animales.
Cada animal se premedicará con Ketamina, Midazolam® y
acepromacina. La dosis de ketamina será de 15 mg/kg, Midazolam
® a dosis de 0,3 mg/kg. Midazolam 1 mg/ml Combino Pharm y
acepromacina 0,02 mg/kg, inyectados por vía intramuscular, en la
extremidad posterior del animal.
Se administrará oxígeno al 100 % , utilizando una máscara de
anestesia de 14 cm de diámetro. mientras el animal permanece en
respiración espontánea.
Se realizará una inducción anestésica con Propofol. La dosis de
Propofol utilizada será de 3 mg /kg, por vía intravenosa. Se
inoculará Besilato de atracurio, Tracrium ®. La dosis de Besilato de
atracurio es de 0,2 mg/kg por vía intravenosa.
Se inoculará como analgésico fentanilo , Fentanest® .
La dosis de fentanilo será de 0,005 mg/kg.
Se conectará al catéter intravenoso un equipo de infusión por
gravedad que se unirá a una bolsa con una solución de ClNa al
0,9%. La dosis de perfusión será de 7 ml/kilo/hora.
Con ayuda de un laringoscopio de pala plana se realizará la intubación del animal
utilizando un tubo orotraqueal de 6,0 oral (6,0 mm ID 6,8 mm OD) y balón de 22
mm Hi-ContourTM. L. La ventilación se realiza con un respirador volumétrico Datex
Ohmeda Aestiva 5. La técnica anestésica y la monitorización se han descrito
anteriormente.
d) Justificación de la necesidad de usar animales para la
obtención de los resultados perseguidos con el procedimiento.
La especie animal se considera la adecuada por las semejanzas
anatómicas del corazón de la especie porcina y la especie humana.
El número de animales se ajusta al número que
estadísticamente se deben emplear para obtener resultados
estadísticamente significativos.
e) Especie y número de animales que se prevé utilizar:
Porcina. Cruce de Pietrain hembra de 35 a 45 kg.
Número de animales:
animales. Procedentes de una granja porcina autorizada.
f) Duración del procedimiento y frecuencia de realización
prevista.
1. Estudio ecocardiográfico y de presiones sanguíneas en cerdos
sanos e implantación del marcapasos. Cuatro horas. Una vez a la
semana. Operándose un cerdo por sesión.
2. Activación y control del marcapasos. Una hora. Revisándose el
marcapasos una vez a la semana.
3.
Estudios
ecocardiográfico,
de
presiones
sanguíneas
y
electrofisiológicos en cerdos con marcapasos. Cinco horas. Una vez a
la semana. Operándose un cerdo por sesión.
g) Fecha prevista de inicio y fecha prevista de finalización del
experimento:
Fecha de inicio: 15-09-2010. Fecha de finalización: 15-09-2012.
h) Destino final de los animales. Método de sacrificio :
Los animales después de sacrificados, se meten en sacos de
plástico. Se congelan veinticuatro horas a –20 ºC. Pasado este
tiempo son retirados por el Servicio de recogida de animales muertos
del Ayuntamiento de Madrid.
En la tercera fase del procedimiento se realizará el explante del
corazón para realizar el estudio del mapeo óptico. Esta actuación es
incompatible con la vida del animal que fallece instantáneamente.
i) Identificación del personal investigador responsable del
experimento:
Dr. Julian Pérez Villacastín. Responsable del Procedimiento.
Homologado con categoría C.
j) Datos del centro responsable de la estabulación de los
animales durante el experimento. Cualquier cambio de
ubicación de los animales a otro centro registrado quesará
reflejado en el libro de registro de estos.
Número de registro correspondiente:
ES280790000088.
Animalario del Hospital Clínico San Carlos. C/ Martín Lagos s/n.
28040. Madrid.
2. Se adjunta informe del Comité ético de Bienestar Animal.
3. Circunstancia por la que se necesita autorización previa y
expresa de la autoridad competente.
Las circunstancias por la que se pide autorización previa y expresa es
la siguiente:
- El procedimiento se realiza en animales de la especie porcina.
- La especie porcina no está incluida en el anexo VII, del R. D.
1201/2005.
Por exigencia del artc. 11. 2. b) del R. D. 1201/2005, se pide
autorización.
- Por exigencia del Anexo XI , apartado b).
Fdo.: Dr. Julian Pérez Villacastín.
Responsable del Procedimiento.
kkkkkkkkkkkkkkkkkkkk
Autorización previa y expresa de procedimientos del Animalario del Hospital
Clínico San Carlos.
Anexo XIII. Del Real Decreto 1201/2005.
Segundo trimestre de 2011.
1. Denominación del procedimiento que se prevé realizar:
2. Objetivos que se persiguen:
3. Metodología del procedimiento:
El procedimiento de implantación de un marcapasos para desarrollar
el mencionado proyecto de investigación, requerirá realizar cuatro
actuaciones en los cerdos:
1. Estudio ecocardiográfico y de presiones sanguíneas en cerdos
Sanos e implantación del marcapasos.
2. Activación y control del marcapasos.
3. Estudio ecocardiográfico de control.
4. Estudio de presiones sanguíneas, electrofisiológico de mapeo
óptico.
1. Estudio ecocardiográfico de presiones sanguíneas en cerdos
Sanos e implantación del marcapasos.
Se realizará un estudio ecocardiográfico utilizando un
ecocardiógrafo Accuson Ciprés Siemens®. Se realizará un estudio
de presiones sanguíneas y un estudio electrofisiológico utilizando
un polígrafo Prucka Cardiolab II Plus 64 General Electric®.
Con anestesia general, analgesia y respiración mecánica, se
realizará una punción de la arteria y la vena femorales. Estas vías
se utilizarán para la introducción de catéteres, para la realización
de estudios electrofisiológicos cardiacos.
Se realizará una punción de la arteria carótida para realizar un
estudio de presiones sanguíneas.
Se disecará la piel y el tejido subcutáneo de la región del cuello. Se
colocará el generador del marcapasos. A través de la vena yugular
hasta la vena cava, se insertará el cable de un marcapasos St Jude®
monocameral en el ventrículo derecho.
Se cerrará la piel utilizando una sutura sintética reabsorbible
multifilamentosa, poliglactina 910 de dos ceros. La línea de sutura se
infiltrará con un anestésico local.
2. Activación y control del marcapasos.
Pasados siete días de la intervención se procederá a activar el
marcapasos. Se realizarán controles periódicos para comprobar el
funcionamiento de éste. El control de la actividad del marcapasos es
una prueba mo invasiva e indolora para el animal. Se realizará en el
alojamiento del cerdo.
3. Estudio ecocardiográfico de control.
sta prueba se realizará con anestesia general y respiración
espontánea o sin anestesia. Dependiendo de los resultados de la
exploración física del animal. Por ser una prueba indolora y no
invasiva podrá realizarse sin anestesia ni analgesia. Esta prueba se
realizará una vez a la semana.
4. Estudio de presiones sanguíneas, electrofisiológico de mapeo
óptico.
Pasados entre Veinticinco y treinta días e la activación del
marcapasos
el marcapasos se realizarán estas pruebas con anestesia general,
analgesia y respiración mecánica. Se realizará una punción de la
arteria carótida para registrar las presiónes sistólica y diastólica. Se
realizará una punción de la arteria y la vena femorales para la
introducción
de
los
catéteres.
Se
realizará
un
estudio
ecocardiográfico. Se realizará un estudio electrofisiológico cardiaco y
se inoculará por vía endovenosa el fármaco Levosimendan. Se
realizará una estereotomía media para explantar el corazón y se
realizarán estudios de mapeo óptico, utilizando el corazón en un
sistema in vitro de baño de órganos.
Anestesia, analgesia y tratamientos en cerdos:
2. Para los estudios ecocardiográfico, de presiones sanguíneas y
electrofisiológicos en cerdos sanos y después de la
implantación del marcapasos.
Para realizar esta parte del procedimiento utilizaremos anestesia
general, analgesia y respiración mecánica.
Se pesará cada animal en una báscula digital, Tru-Test Eziweigh
®
1 para animales.
Cada animal se premedicará con Ketamina. Ketolar®. La dosis
utilizada de ketamina será de 20 mg/kg, inyectada por vía
intramuscular, en la extremidad posterior del animal. Diez minutos
después se lavará el animal con agua y jabón y se le secará. Se
trasladará el animal al quirófano utilizando un carro de transporte
hidráulico. Se le subirá a la mesa de cateterismos.
Se administrará oxígeno al 100 % , se utilizará una máscara de
anestesia de 14 cm de diámetro, mientras el animal permanecerá en
respiración espontánea.
Se realizará una inducción anestésica con Propofol 1%. Se
inoculará una dosis de Propofol de 6 mg /kg, por vía intravenosa, a
través de un catéter intravenoso Vasocán® de 22 G 1” de calibre,
que se introducirá por la vena marginal de la oreja.
Se inoculará Besilato de atracurio, Tracrium® 50 mg. Glaxo
Smithkline S. A.
La dosis utilizada de Besilato de atracurio será de 0,2 mg/kg
por vía intravenosa.
Se inoculará como analgésico fentanilo , FENTANEST® KERN
PHARMA. La dosis de fentanilo empleada será de 0,005 mg/kg/h.
Se conectará al catéter intravenoso un equipo de infusión por
gravedad que se unirá a una llave de tres pasos.
Se inoculará, una solución de ClNa al 0,9%. La dosis de
perfusión será de 3 ml/kg/h.
Se utilizará un laringoscopio de pala plana, se levantará la
epiglotis del animal y se le introducirá un tubo orotraqueal de 6,0 oral
(6,0 mm ID 6,8 mm OD) y balón de 22 mm Hi-ContourTM. L. Se
hinchará el balón para fijar el tubo a la tráquea. La ventilación se
realizará utilizando un respirador volumétrico Datex Ohmeda Aestiva
5®.
Se suministrará un volumen tidal de 10 ml/kg, una frecuencia
respiratoria de 11 a 12 respiraciones por minuto, una presión máxima
inspiratoria de 20 mm de H2O y una PEEP de 4 mm de H2O. Se
suministrará una mezcla de oxígeno y aire medicinal de 100 ml/kg de
peso e Isoflurano, al 2%.
Se comprobará que el tubo endotraqueal está situado en la
tráquea, observando que aparezca en el monitor la curva de CO 2
espirado y auscultando con un fonendoscopio los dos hemitórax, para
oir la la ventilación de ambos pulmones.
Se monitorizará el animal, colocándole cuatro electrodos adhesivos
en la articulación húmero radiocubital de ambas extremidades
anteriores y en la articulación femorotibiorotuliana de ambas
extremidades posteriores. Se registrarán las derivaciones bipolares D
I, D II, D III y las derivaciones monopolares aumentadas avR, avL,
avF. La velocidad de registro será de 25 mm/seg y la amplitud será
de 1 cm/mV. También se monitorizará el animal con seis ó doce
derivaciones electrocardiográficas conectadas a un polígrafo. A este
equipo se conectará una línea para medir presiónes arteriales.
Se colocará un pulsioxímetro en la lengua del animal, dentro de la
cavidad bucal, para medir la saturación de oxígeno. Consideraremos
una saturación de oxígeno correcta un valor de 99 %. Se medirá el
CO2 espirado con una sonda de capnografía, unida al la salida del
tubo endotraqueal. Siendo el registro correcto entre 35-45 mm Hg.
Los gases anestésicos residuales se eliminarán mediante aspiración
por una torre de vacío.
Al finalizar la implantación del marcapasos y después de realizar
registros de presiones y el estudio electrofisiológico de control se
procederá a despertar el animal. Se mantendrá tapado el animal con
una manta térmica, se suprimirá el aporte de isoflurano y se
suministrará la mezcla de oxígeno y aire medicinal frescos hasta que
el animal respire espontáneamente y recupere la consciencia. En este
momento se extraerá el tubo endotraqueal.
Posteriormente se conducirá el animal al cercado existente en la
habitación de cerdos en experimentación del animalario. Para ello se
utilizará el carro hidráulico de transporte.
2. La anestesia local se realiza mediante una infiltración de la zona
quirúrgica del cuello con Mepivacaína al 2 %. B Braum® , un vial de
10 ml.
3. Tratamiento postoperatorio:
Se inoculará antibiótico durante 5 días: Amoxicilina y ácido
Clavulánico, Synulox®. La dosis será 11-22 mg/Kg por vía
intramuscular.
Se inoculará un antiinflamatorio no esteroideo: Meloxicam ® a
dosis de 0,2 mg/ kg por vía subcutánea durante 5 días.
Se inoculará analgésico: Buprenorfina, Buprex ®, a dosis 0,01
mg/kg por vía intramuscular.
2. Para la activación y el control del marcapasos se utilizará el
siguiente protocolo de anestesia general y respiración espontánea:
Se pesará cada animal en una báscula digital para animales.
Cada animal se premedicará con Ketamina, Midazolam ® y y
acepromacina.
La dosis de de ketamina que se utilizará será de 15 mg/kg.
La dosis de Midazolam que se utilizará será de 0,3 mg/kg.
Midazolam® 1mg/ml Combino Pharm y acepromacina maleato de
acepromacina, Calmo Neosan ® pfizer. 0,02 mg/kg. inyectados por
vía intramuscular, en la extremidad posterior del animal.
Posteriormente se lavará el animal y se transportará a quirófano
como se ha ha descrito anteriormente.
Se administrará oxígeno al 100 % , utilizando una máscara de
anestesia de 14 cm de diámetro. mientras el animal permanecerá en
respiración espontánea.
Se realizará una inducción anestésica con una mezcla de gases.
Se suministrará una mezcla de oxígeno y aire medicinal de 100 ml/kg
de peso e Isoflurano (Forane® ) al 2%.
Se monitoriza al animal, colocándole cuatro electrodos adhesivos
como se ha descrito anteriormente.
Es método de activación y control del marcapasos indoloro y no
invasivo.
Al finalizar la activación del marcapasos o los registros de control se
procederá a despertar al animal. Se suprimirá el aporte de isoflurano
y se suministrará la mezcla de oxígeno y aire medicinal fresco hasta
que el animal despierte. El control del funcionamiento del marcapasos
se podrá realizar sin anestesia ni analgesia, por ser un procedimiento
no invasivo e indoloro.
3. Estudios ecocardiográfico, de presiones y electrofisiológico en
cerdos con marcapasos.
Para esta parte del procedimiento utilizaremos anestesia general
y respiración mecánica.
Se pesará cada animal en una báscula digital marca Tru-Test
Eziweigh 1® para animales.
Cada animal se premedicará con Ketamina, Midazolam® y
acepromacina. La dosis de ketamina será de 15 mg/kg, Midazolam
® a dosis de 0,3 mg/kg. Midazolam 1 mg/ml Combino Pharm y
acepromacina 0,02 mg/kg, inyectados por vía intramuscular, en la
extremidad posterior del animal.
Se administrará oxígeno al 100 % , utilizando una máscara de
anestesia de 14 cm de diámetro. mientras el animal permanece en
respiración espontánea.
Se realizará una inducción anestésica con Propofol. La dosis de
Propofol utilizada será de 3 mg /kg, por vía intravenosa. Se
inoculará Besilato de atracurio, Tracrium ®. La dosis de Besilato de
atracurio es de 0,2 mg/kg por vía intravenosa.
Se inoculará como analgésico fentanilo , Fentanest® .
La dosis de fentanilo será de 0,005 mg/kg.
Se conectará al catéter intravenoso un equipo de infusión por
gravedad que se unirá a una bolsa con una solución de ClNa al
0,9%. La dosis de perfusión será de 7 ml/kilo/hora.
Con ayuda de un laringoscopio de pala plana se realizará la intubación del animal
utilizando un tubo orotraqueal de 6,0 oral (6,0 mm ID 6,8 mm OD) y balón de 22
mm Hi-ContourTM. L. La ventilación se realiza con un respirador volumétrico Datex
Ohmeda Aestiva 5. La técnica anestésica y la monitorización se han descrito
anteriormente.
4. Justificación de la necesidad de usar animales para la obtención de los resultados perseguidos
con el procedimiento.
La especie animal se considera la adecuada tanto por las semejanzas anatómicas
de la especie porcina y la especie humana.
El número de animales se ajusta al número que estadísticamente se deben
emplear para obtener resultados estadísticamente significativos.
No hay un método alternativo al uso de la especie animal , ni la posibilidad de
sustituir los animales de experimentación por otras técnicas alternativas.
5. Especie y número de animales que se prevé utilizar:
Especie: Porcina. Sexo: Hembras.
Número de animales: 35 animales. Procedentes de una explotación ganadera porcina
autorizada.
6. Duración del procedimiento y en su caso frecuencia de realización prevista.
La fase de medición de la presión, el estudio ecocardiográfico y electrocardiográfico y
la implantación del marcapasos duratres horas.
Los controles del marcapasos, no invasivos duran quince minutos.
El estudio ecocardiográfico de control de la insuficiencia cardiaca dura treinta
minutos.
El estudio final de presiones, estudio ecocardiográfico, electrocardiográfico y los
estudios de mapeo óptico duran cinco horas.
Cada cerdo debe tener implantado el marcapasos como mínimo veinticinco días.
Se pretende realizar elprocedimiento completo a dos cerdos cada 45 días.
6. Fecha prevista de inicio y fecha prevista de finalización del procedimiento:
Fecha prevista de inicio: 16-05-2011.
Fecha prevista de finalización del procedimiento: 16-05-2014.
7. Destino final de los animales:
Los animales después de eutanasiados, se meten en sacos de plástico. Se congelan
veinticuatro horas a –20 ºC. Pasado este tiempo son retirados por el Servicio de
recogida de animales muertos del Ayuntamiento de Madrid.
8. En caso de sacrificio, método utilizado: En la última fase del procedimiento se
realiza la extracción del corazón para realizar estudios de mapeo óptico. Esta actuación
es incompatible con la vida del animal. En caso de aplicar el punto final al
procedimiento se utilizará una sobredosis de tiopental. ( 2 g de tiopental sódico por vía
intravenosa).
9. Identificación del personal investigador responsable del procedimiento:
D. Julián Pérez Villacastín. Homolgado con categoría C.
.
10. Datos del centro responsable de la estabulación de los animales durante el
procedimiento.
Número de registro correspondiente:
ES280790000088.
Animalario del Hospital Clínico San Carlos. C/ Martín Lagos s/n. 28040. Madrid.
Fdo.: D. Julián Pérez Villacastín.
Responsable del Procedimiento
Madrid, a 25 de abril de 2011.