Proyectos de Investigación IVIA MEMORIA CIENTIFICO-TÉCNICA

Proyectos de Investigación IVIA
MEMORIA CIENTIFICO-TÉCNICA
LÍNEA PRIORITARIA: Virología
TÍTULO DEL PROYECTO: Saneamiento y diagnóstico de patógenos de cítricos
DURACIÓN PREVISTA: 4 AÑOS
CENTRO: PROTECCIÓN VEGETAL
1. ANTECEDENTES-INTRODUCCIÓN
El mantenimiento de la producción y competitividad del sector citrícola depende en gran
medida de la disponibilidad de material vegetal sano y de alta calidad, tanto en
variedades como en patrones. Los cítricos son susceptibles a la infección por distintos
agentes patógenos transmisibles por injerto que causan importantes pérdidas económicas
y en algunas zonas constituyen el principal factor limitante del cultivo ya que se propagan
junto con el material vegetal. Algunas de las enfermedades transmisibles por injerto se
pueden controlar fácilmente mediante saneamiento y certificación del material vegetal
propagado ya que se dispersan únicamente con las yemas infectadas, mientras que otras,
además de propagarse con el material vegetal, se pueden transmitir mecánicamente con
herramientas de corte o mediante insectos que actúan como vectores del agente
patógeno aumentando su incidencia y dificultando el control de la enfermedad. En este
caso, además de los Programas de Saneamiento, Cuarentena y Certificación, es
necesario adoptar medidas adicionales como la utilización de genotipos resistentes o
tolerantes, el control de vectores o la protección cruzada.
La disponibilidad de la técnica de microinjerto permitió iniciar en 1975 el Programa de
Mejora Sanitaria de variedades de Cítricos (CVIPS) con los siguientes objetivos: a)
obtención de plantas libres de patógenos mediante la técnica de microinjerto de todas las
variedades cultivadas en España; b) establecimiento de un banco de germoplasma de
cítricos con las plantas sanas y c) distribución de material libre de patógenos a los viveros
de cítricos a través de un sistema de certificación. Cuando la obtención de plantas sanas
de las variedades locales estuvo en marcha, el sector empezó a reclamar la introducción
de variedades de calidad procedentes de otros países y en 1982 se reguló la importación
de material vegetal de cítricos mediante el procedimiento de cuarentena in vitro. En
CVIPS se combinan de forma coordinada los programas de Saneamiento, Cuarentena
y Certificación, que son imprescindibles para producir plantas de vivero sanas, lo cual
permite poder controlar las enfermedades transmisibles por injerto. Cada uno de los
programas es responsabilidad de una institución pública diferente. El Programa de
Saneamiento es competencia del IVIA, el de Cuarentena del MAGRAMA y el de
Certificación se realiza de forma compartida entre el MAGRAMA y los servicios
competentes de las Comunidades Autónomas. Sin embargo, desde el inicio de los
mismos existe una coordinación estrecha entre las instituciones implicadas, lo que permite
que todas las actividades técnicas relacionadas con la eliminación de enfermedades y el
diagnóstico de patógenos se realice en el IVIA con métodos y dirección técnica comunes,
facilitando la aplicación inmediata en los diferentes programas de cualquier avance
científico en estos campos.
Actualmente existe una creciente demanda de nuevas variedades comerciales y
sigue siendo necesario importar genotipos para conservación de germoplasma, por lo que
las necesidades de saneamiento de variedades obtenidas en España y de cuarentena de
variedades de otros países están aumentando de forma importante. A ello contribuye
también el hecho de que todas las nuevas variedades que se están produciendo en el
mundo se someten a procesos de protección, que requieren que el material que se
somete a los mismos esté libre de patógenos. Una consecuencia de esta situación es el
importante y continuo incremento de convenios con empresas para el saneamiento e
importación de variedades. Por todo ello se hace necesario mejorar constantemente toda
la tecnología empleada en CVIPS para reducir los plazos del procedimiento manteniendo
todas las garantías del proceso y para evitar la entrada de material vegetal ilegal que
podría suponer la dispersión de graves enfermedades.
Para garantizar la ausencia de patógenos en las plantas saneadas, en CVIPS siempre
que es posible se emplean dos métodos de diagnóstico para cada patógeno analizado.
Los Programas de Saneamiento y Cuarentena incluyen todos los patógenos de cítricos
conocidos, mientras que el Programa de Certificación sólo incluye los patógenos que se
han detectado en el país. Las pruebas de diagnóstico de patógenos empleadas en CVIPS
se realizan mediante ensayos biológicos en plantas indicadoras y con técnicas
moleculares. Los ensayos biológicos son sensibles y fiables, pero resultan inespecíficos,
lentos y costosos. En 1978 se comenzaron a implantar las técnicas moleculares de
diagnóstico y actualmente se han desarrollado numerosos métodos de detección de
diferentes patógenos que se están aplicando rutinariamente en el programa. Estas
técnicas complementan los ensayos biológicos y son específicas, sensibles y mucho más
rápidas. En ningún caso se puede afirmar que una planta está libre de todos los
patógenos, sino que no se han detectado los patógenos a los que se ha analizado con las
técnicas que se han usado.Las técnicas moleculares de detección de patógenos
evolucionan constantemente por lo que los nuevos métodos o las mejoras de los
existentes se deben incluir en estos programas. Además, hay patógenos cuyo agente
causal se desconoce y sólo se pueden diagnosticar mediante métodos biológicos por lo
que es necesario identificarlos para poder desarrollar métodos moleculares que permitan
la detección específica, sensible y rápida de los mismos. Por otro lado, también es
posible la aparición de nuevos patógenos, por lo que tenemos que ser capaces de
adaptar las nuevas tecnologías que van apareciendo para evitar su introducción y/o
dispersión.
2.- OBJETIVOS DEL PROYECTO
2.1. OBJETIVO GENERAL
Saneamiento mediante microinjerto de ápices caulinares in vitro de nuevas variedades de
cítricos procedentes tanto de España (Programa de Saneamiento) como de otros países
(Programa de Cuarentena) y desarrollo de métodos específicos, sensibles, fiables y
rápidos de diagnóstico de patógenos de cítricos.
2.2. OBJETIVOS CONCRETOS
1. Saneamiento mediante microinjerto de ápices caulinares in vitro de nuevas
variedades de cítricos procedentes tanto de España (Programa de Saneamiento)
como de otros países (Programa de Cuarentena). El saneamiento del material
vegetal sirve para garantizar el estado sanitario de las nuevas variedades que se
utilizarán para propagarlas comercialmente o para ampliar la variabilidad del banco
de germoplasma.
2. Desarrollo de métodos específicos, sensibles, fiables y rápidos de diagnóstico de
patógenos de cuarentena. Existen enfermedades devastadoras que no están
presentes en España y cuya introducción sería catastrófica para nuestra
citricultura. Además siempre existe la posibilidad de aparición de nuevas
enfermedades. Para evitar su introducción es necesario desarrollar nuevos
métodos de detección de patógenos mediante técnicas moleculares que garanticen
un diagnóstico rápido, fiable y específico de losmismos.
3. Desarrollo de métodos de diagnóstico molecular de patógenos transmisibles por
injerto presentes en España. En nuestro país existen algunas enfermedades
incluidas en el Programa de Certificación cuyo agente causal se desconoce y por lo
tanto sólo se pueden diagnosticar inespecíficamente mediante métodos biológicos.
Sería importante determinar sus agentes causales para poder desarrollar métodos
moleculares de detección que harían el sistema más eficiente y rápido.
4. Desarrollo de métodos moleculares para la detección simultánea de diferentes
patógenos. Su aplicación serviría para disminuir costes en el Programa de
Certificación.
5. Aplicación de los métodos de diagnóstico desarrollados en los Programas de
Saneamiento, Cuarentena y Certificación. El panel de técnicas para la detección
rápida, específica y sensible de patógenos de plantas mejora continuamente por lo
que el objetivo es poner a punto y aplicar las nuevas técnicas que aparezcan para
la detección de todos los patógenos transmisibles por injerto de cítricos.
6. Análisis del banco de germoplasma con las nuevas técnicas de diagnóstico de
patógenos desarrolladas. Las plantas del banco de germoplasma son las plantas
madre a partir de las cuales se propagan millones de plantones. Por lo tanto, para
garantizar la sanidad de las mismas hay que analizarlas todas cada vez que se
desarrolla una técnica de detección para un patógeno nuevo.